rTrypsin N 蛋白酶 Protease-N 酶切N端的蛋白酶 酶切蛋白N端的蛋白酶 酶切蛋白质N端的蛋白酶 质谱级

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产品介绍：质谱级rTrypsin-N蛋白酶特异性水解在赖氨酸K和精氨酸R片段的N端的肽键。是Trypsin的镜像蛋白酶，酶切N端的系列蛋白酶

物理形态：质谱级rTrypsin-N蛋白酶是冻干粉

分子量：29kDa.

溶解液：使用超纯水40ul溶解后使用， PH=7.5

储存条件：冻干粉末存储在-20℃冰箱，再溶解的酶储存在-20℃或-80℃

保质期：在-80℃可储存24个月

pH 值范围：在PH7.5 时， rTrypsin-N 具有最佳活性

适用范围：rTrypsin-N蛋白酶特异性水解变性后蛋白质K位和R位肽键

通用溶液酶解法：

蛋白酶推荐酶切体系：20-50mM HEPES或Tris 缓冲液

使用条件：按照   20：1 蛋白和蛋白酶的量(w/w)使用,   37°C恒温反应4小时以上.

温馨提示：

1、最大活性：建议蛋白样本经过变性和烷基化处理后，同时严格执行酶切反应体系和SOP

2、敏感性： 对1mM DTT,   0.1mM盐酸胍,   0.8M尿素，5%乙腈 敏感，会降低酶切效率

质量控制（Quality Control）

纯度：液相色谱280nm检测杂质蛋白质峰强度，rTypsin-N峰强度大于99.0%

专一性：人血清白蛋白HSA样品，ESI-MS/MS质谱分析R/K端的专一性大于95.0%

活性：140unit/mg：单位定义：rTrypsinN蛋白酶在366nm最大光密度值半数时，酶切叠氮酪蛋白的单位量，反应条件：37℃保温30min，PH=10

Maldi TOF质谱检测：纯化后的蛋白酶使用FA基质激光解析质谱分析未见杂质蛋白质峰

LC-MS/MS质谱分析：使用rTrypsinN酶解HSA(人血清白蛋白，纯度99.9%)实验，DTT还原、IAA保护、PH7.5、37℃恒温酶切4小时，液质Q-E联用仪分析，覆盖率83%